理解しやすく、役立つエイズのブログ-血液の鉄人のささやき-
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血液センターのNAT検査はどの様なウイルスを検査できるのか

核酸増幅検査(NAT:Nucleic acid Amplification Test )とは、輸血用血液製剤の安全性確保の一環として日本赤十字社が実施している各種病原体の検査のひとつで、HBV、HCV、HIVを同時に検査できます。

検査は血液中のウイルス遺伝子を構成する核酸(DNAまたはRNA)の一部を約1億倍に増幅して検出する極めて感度と特異性の高い検査方法です。

検出感度は以下のとおりです。

・HBV 平均検出感度  3.2IU/mL
・HCV 平均検出感度 12.4IU/mL
HIV-1 Group M 平均検出感度 41.8IU/mL
HIV-1 Group O 平均検出感度 93.7 copies/mL
HIV-2 平均検出感度 2.0 copies/mL

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tag : NAT検査 HIV

梅毒の流行未だ収まらず!!

日本国内における2019年4月7日現在の 梅毒患者数は、1627人でその流行は収まっていません。

50人以上の患者数の発見された都道府県は以下のとおりです。

埼玉県  55人
東京都 425人
愛知県  88人
大阪府 278人
兵庫県  88人
福岡県  64人

このままの状況では2019年も5000人を超える機能性があります。

梅毒の流行の影にはHIVの流行があることを忘れてはなりません。

危険な行為をしてしまった場合は、必ず梅毒検査とHIV検査を埋めることを強くおすすめします。

テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : 梅毒

2018年のいきなりエイズの現状

2019年3月23日、エイズ動向委員会は2018年1年間の新規HIV感染者は、2017年より101人減り、1288人だったとの速報値を発表しました。

今回感染者が減少した理由は不明で、単に一時的な減少の可能性も否定できません。

今回も注目すべき点は、やはりい"きなりエイズ"が多いことです。

いわゆるエイズを発症してからHIV感染に気づく"きなりエイズ"は、367人で28%に上ります。

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : いきなりエイズ

偽装の達人梅毒!!

梅毒は"偽装の達人"の異名をとる行為性感染症として有名です。

その多様な症例から、カナダ生まれの内科医であるウイリアム・オスラー(1849~1919)から"偽装の達人 (the great imitator) "と呼ばれました。

ではなぜ梅毒は"偽装の達人"と称されるのでしょうか?

梅毒トレポネーマに感染すると、感染した箇所即ち性器に出来たシコリや潰瘍、リンパ節の腫れは痛みがなく、ピンク色の皮疹など典型的な症状のほか、視力の低下、関節の痛み、頭痛などおよそ性行為感染症とは結びつかない多彩な症状を発現します。

要するに梅毒は、多彩な症状や病態を示すことから"偽装の達人"も呼ばれます。

梅毒は、3週・3ケ月・3年と症状を変化させていきます。


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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : 梅毒

梅毒の用語解説-その3-

18.STS検査

非トレポネーマ脂質抗体(カルジオリピン)を使用する検査。

梅毒トレポネーマの感染によって組織から出るレアギン体を検出する検査で、梅毒特異的ではないが、梅毒トレポネーマの感染を早く知ることが出来、梅毒の活動性の指標(治療の指針)を調べる検査。

一般的に「梅毒血清反応検査(STS; Serological test for syphilis)」と呼ばれている。

※RPRカードテスト法(Rapid Plasma Reagin Test)や自動機器で検査するラテックス粒子凝集法※

19.梅毒トレポネーマ抗体検査(TP検査)

梅毒トレポネーマを抗原として、TP抗体(梅毒トレポネーマ抗体)を検出する検査法。

梅毒特異抗体検査には、TPHA、TPPA、TPLA、FTA-abs、イムノクロマト迅速検査。

20.梅毒抗体検査

梅毒トレポネーマ抗体と非トレポネーマ脂質抗体の両方を指す用語として使用する。

21.直接検出(鏡検)

初期硬結・軟性下疳・扁平コンジローマなど、病原体がいそうな部位をメスなどで傷つけ、出てくる液体をインクで染めて、油浸レンズで観察し梅毒トレポネーマを見つける。

22.生物学的偽陽性反応

梅毒以外の疾患でもリン脂質に対する抗体が産生され、反応が陽性となることがあります、これを生物学的偽陽性(Biological False Positive:BFP)といいます。

tag : 梅毒 梅毒検査

梅毒の用語解説-その2-

梅毒に関する用語集の続きです。

11.活動性梅毒

治療を必要とする梅毒

12.陳旧性梅毒

治癒した状態の梅毒(治療を必要としない梅毒)。

※梅毒抗体がTP検査で陽性となるが治癒状態のもの※

13.潜伏梅毒

自他覚症状のない活動性梅毒(他人に感染させる)。

14.妊娠期梅毒

妊娠中に梅毒トレポネーマ感染と診断された母体の活動性梅毒。

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : 梅毒

梅毒の用語解説-その1-

梅毒の大流行に鑑みて、梅毒に関する用語を水会に分けてわかり易く解説していきます。

1.梅毒一次病変

性的接触等で梅毒トレポネーマが侵入した部位にできる病変のことを言います。

※皮膚病変としては、初期硬結、硬性下疳などがあるが、あいまいなびらん程度のこ
ともある※

2.梅毒二次病変

梅毒トレポネーマが体内で増殖し、血流に乗って体の隅々まで運ばれ、運ばれた先でできる病変のことを言います。

※病変は皮膚だけとは限らず、あらゆる臓器に引き起こされます※

※典型的な皮膚病変としては梅毒性バラ疹、丘疹性梅毒疹、扁平コンジローマなどがあります※

3.早期梅毒

梅毒トレポネーマに感染してから 1年以内の活動性梅毒。

※性交渉などの接触により第三者に感染させる力のある時期※

4.後期梅毒

梅毒トレポネーマに感染してから 1 年以上経過した活動性梅毒。

※第三者への感染力はほぼない時期※

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : 梅毒

新年のご挨拶

恭賀新年

昨年中は格別のご用命を賜り厚く御礼申し上げます。

本年も皆様方のお役に立てるよう頑張っていきますので、なにとぞよろしくご愛顧のほどお願い申し上げます。

テーマ : 感謝をこめて
ジャンル : 心と身体

tag : 新年のご挨拶

HIV検査の種類について-7. アキュジーン m-HIV-1について-

アキュジーン m-HIV-1とは】

HIV-1 RNAを定量的に検出するRT-PCR法(逆転写ポリメラーゼ連鎖反応)を用いた検査です。

【販売メーカ】

アボット社が販売しています。

【最小検出感度】

検体量0.6ml→40コピー/ml

検体量0.5ml→75コピー/ml

検体量0.2ml→150コピー/ml

【測定範囲】

40コピー/ml~10の7乗コピー/ml

【特異性】

100%

【非特異反応の出現率】

おそらく0%

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : アキュジーン m-HIV-1

HIV検査の種類について-6.リアルタイムPCR検査-

リアルタイムPCR検査とは】

HIV-1の核酸の一部の見つける検査法です。

注意:HIV-2は検出出来ません!!

リアルタイムPCR検査の原理とは】

HIV-1の核酸を化学的な方法で、1億倍程度に増幅して検査をすることから検出感度も非常に高く血液中の微量のHIV-1を調べることが出来ることから、HIV-1感染の判断検査として広く用いられています。

リアルタイムPCR検査の正式名称は】

『コバス taqMan HIV-1「オート」』と呼びます。

健康保険の名称は『HIV-1核酸増幅定量精密検査』です。

【どのように検査をするのか】

1.検査キット附属の定量標準HIV RNAを含む「カオトロピックイオン溶液」で、HIV-1を溶解して、シリカ粒子であるTaqMan磁性粒子懸濁液を使用して、HIV-1 RNA及びHIV-1RNAを精製する。

2.試料より抽出されたHIV-1 RNA及びHIV-1 QS RNAに自動調製された増幅試薬を加える。

3.核酸抽出から増幅試薬の添加までの工程は、専用機器コバスAmpliPrepを、RNAの増幅及び定量は専用機器コバスTaqManを使用して行われる。

4.各サイクルの「Z05 DNAポリメラーゼによる相補鎖の伸長」と「DNAプローブの切断・遊離による蛍光発光」の各ステップで測定された蛍光強度がリアルタイムにモニターされ、反応液中のHIV-1 RNA及びHIV-1 QS RNAの増幅曲線が得られます。

5.この際、HIV-1 RNA用のTaqManプローブとHIV-1 QS RNA用のTaqManプローブでは波長の異なる蛍光色素を使用していることから、それぞれの識別は可能となります。

6.得られた増幅曲線から蛍光強度が一定以上となるサイクル数を求めて、カットオフ値(Ct値:Critical threshold value)とします。

7.、血液中のHIV-1 RNA濃度を計算すます。

8.発光強度が一定以上に達しないときは、HIV-1 RNAのCt値として計算されないために、HIV-1 RNAは算出されません。

9.検査法を端的に言いますと【血液中のHIV-1を特殊な薬品で、1億倍に増殖させて、HIV-1の遺伝子の一部の核酸を機械的に調べる】検査です。

【検査成績の記録】

検出範囲は、40~1.0×10の七乗コピー/mLです。

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tag : HIV検査 リアルタイムPCR

HIV検査の種類について-5.NAT検査-

NAT検査とは】

核酸増幅検査(Nucleic Acids Amplification Test)のことです。

この検査は、ウイルスを構成する核酸(DNAまたはRNA)の一部を約1億倍に増幅(数を増やす)し検査を行うことから非常に感度と特異性が高く、ウインドウ・ピリオドの短縮を可能にします。

NAT検査は、日本赤十字社の血液センター専用の検査方法で、医療機関や保健所で受けることは出来ません。

血液センターでは1999年からNAT検査を導入しています。

血液センターのNAT検査は、HIV、HBV、HCVの検査を同時に行う検査法です。

従ってNAT検査が陽性になるとHIV、HBV、HCVのそれぞれの個別NAT検査を実施してどれが陽性かを鑑別する必要があります。

血液センターのNAT検査は、HIV-2の検出も可能となっています。

リアルタイムPCR検査はHIV-2を検出できません※

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : NAT検査 リアルタイムPCR検査

HIV検査の種類について-4.イムノクロマト法による迅速抗原抗体検査-

イムノクロマト法による迅速抗原抗体検査は、日本においては"エスプライン HIV Ag/Ab"と"ダイナスクリーン・HIV Combo"のふたつがあります。

これらは血清、血漿及び全血中のHIV-1の抗原であるp24とHIV-1及びHIV-2抗体の検出をおこなう第四世代(抗原+抗体)の迅速HIVスクリーニング検査試薬です。

両者とも特異性と感度はほぼ同一です。

【検査を受ける時期】

1.HIV-1の抗原であるp24を見つけるためには、不安な行為から30日で受けるのが最善。

※50日までは信頼できる結果は得られますが、不安な行為から50日を超えると血液中のHIV-1の抗原であるp24の量が少なくなっていくことから見逃し偽陰性となる確率が高くなります。

2.HIV-1とHIV-2の抗体を見つけるためには、不安な行為から12週で受ける必要があります。

【結果の解釈】

1)不安な行為から30~50日で陽性・・・HIV-1の感染の疑い

2)不安な行為から12週で陽性・・・HIV-1又はHIV-2の感染の疑い

※どちらに感染しているかは、再度HIV-1とHIV-2の検査を個別に実施する必要があります※

3)不安な行為から12週で陰性・・・HIV-1とHIV-2共に感染は否定。

4)不安な行為から30日で陰性・・・HIV-1の感染は否定できるが、HIV-2の感染は否定できていないので、12週で陰性を確認する必要があります。

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : イムノクロマト法による迅速抗原抗体検査 エスプラインHIV Ag/Ab ダイナスクリーン・HIV Combo

HIV検査の種類について-3.第四世代抗原抗体検査法-

今回解説する第四世代抗原抗体検査の測定法は、下記の方法があります。

1.CLIA法(Chemiluminescent Immunoassay:化学発光免疫測定法)

2.ECLIA法(Electro Chemiluminescent Immunoassay:電気化学発光免疫測定法)

3.ELFA法(Enzyme Linked FluorescentAssay:蛍光酵素免疫測定法)

イムノクロマト法による第四世代抗原抗体検査は次回解説いたします。

HIV-1のコア蛋白質であるP24抗原を検出するのが第四世代検査薬で、HIV抗原抗体検査と呼ばれます。

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

tag : HIV 第四世代抗原抗体検査

HIV検査の種類について-2.第三世代抗体検査-

エライサ法

【HIV抗体検査のエライサ法とは】

エライサ法とは免疫学的測定法のひとつで、抗体を使った免疫学的測定法のひとつでもあり、正式名称は,Enzyme-linked immuno-sorbent assay と言います。

エライサとは、このEnzyme-linked immuno-sorbent assayの頭文字のELISAの略称です。

別名酵素免疫測定法とも言われますがエライサ法の方がよく知られています。

また、EIA法とも呼ばれます。

EIA法は、Enzyme Immunoassayの略称です。

【測定原理】

エライサ法とEIA法の測定原理は同じです。

エライサ法は、マイクロプレートやチューブにHIV抗原を吸着させて検査を行いますが、EIA法はビーズにHIV抗原を吸着させて検査を行います。

エライサ法は抗体と酵素を使った測定法です。

一般的には、96のウェル(穴)を持つマイクロプレートを使い、このウエル内部の表面にHIV抗原を吸着(コーティングとか固相化とも言います)させて使用します。

このHIV抗原は、血清又は血漿中にあるHIV抗体を補足するために使われます。

HIV抗原を吸着したウエルに血清または血漿を加えて一定温度で一定時間放置し、ウエルを薬品で洗浄しそこに酵素標識抗体を加え更に一定温度で一定時間放置し、ウエルを薬品で洗浄し最後に基質を加えてから、酵素標識抗体の発色を機械で測定します。

血清又は血漿中にHIV抗体が存在すれば、ウエルに吸着させたHIV抗原にHIV抗体が結合し、この結合物に酵素標識抗体が更に結合し、発色するわけです。

血清又は血漿中にHIV抗体が存在しなければ、ウエルに吸着させたHIV抗原には何も結合しませんので、酵素標識抗体も結合すること無く発色もしません。

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テーマ : 医療・病気・治療
ジャンル : 心と身体

HIV検査の種類について-1.イムノクロマト法-

【はじめに】

現在のHIV検査には、

1.リアルタイムPCR検査

2.第三世代の抗体検査

・エライサ法

・PA法

3.第四世代の抗原抗体検査

・酵素免疫測定法

・エライサ法

4.イムノクロマト法による迅速抗原抗体検査及び迅速抗体検査

などがあります。

多くの方からHIV検査とその検査手技についての質問を受けますので、数回に分けてHIV検査の手技について解説していきたいと思います。

今回は第一回目として、イムノクロマト法について解説いたします。

【HIV抗体検査のイムノクロマト法とは】

イムノクロマト法により血漿、血清、全血を使用してこれらの中に存在する抗HIV‐1抗体及び抗HIV-2抗体を検出するキットです。

日本において厚生労働省から認可を受けているキットは、アリーアメディカルから販売されている『ダイナスクリーン』一つしか存在しません。

【測定原理】

検体(血液・血漿・血清)中の抗HIV抗体は、シート下部のセレニウムコロイド標識HIV抗原と反応し、抗HIV抗体-セレニウムコロイド標識HIV抗原の結合物を形成し、この結合物はシート上を移動して、シート上部に固相化されたHIV抗原と結合し、固相化HIV抗原-抗HIV抗体-セレニウムコロイド標識HIV抗原のサンドイッチ型の結合物を形成します。

その結果結シート上の判定窓に出現するセレニウムコロイド由来の赤色のラインの有無を目視で判定します。

この場合、必ずコントロールラインに赤色のラインが出現している必要があります。

コントロールラインに赤色のラインが認められない場合は、検査が正しく実施されていないことから、再度検査を実施する必要があります。

【測定結果の判定法】

シートの各ストリップ上には、上下に分かれて 2 つの判定窓があり、この 2 つの窓を観察し、赤色のラインの有無を確認する。

結果を判定する前に、測定操作が正しく行われたことを確認するために、ストリップ上部のコントロール窓の中に赤色のライン(コントロールライン)が現れていることを必ず確認する。

コントロールラインが認められる場合は検査結果は有効であるが、認められない場合は検査結果は無効とし、再検査を行う。

※判定ラインに赤色のラインが認められた場合は、赤色の強弱にかかわらず陽性と判定する※

※判定ラインの赤色の強さは、HIV抗体の力価を定量的に反映しません※

※定められた判定時間15分を経過後、判定ラインに薄くラインが出現しても陽性とは判定しない※

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テーマ : 薬・医者・病院等
ジャンル : 心と身体

tag : HIV検査 イムノクロマト法

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